AAT Bioquest11305 Amplite® Colorimetric Superoxide Dismutase (SOD) Assay Kit 200Tests 

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美國(guó)AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開(kāi)發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助quan世界的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest會(huì)不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個(gè)領(lǐng)域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest11305 Amplite® Colorimetric Superoxide Dismutase (SOD) Assay Kit 200Tests，產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號(hào)：11305

產(chǎn)品名稱：Amplite®比色超氧化物歧化酶（SOD）測(cè)定試劑盒

英文名稱：Amplite® Colorimetric Superoxide Dismutase (SOD) Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：200 Tests

 AAT Bioquest比色超氧化物歧化酶測(cè)定試劑盒

產(chǎn)品說(shuō)明：

超氧化物歧化酶（SOD）是一類催化超氧化物歧化為氧氣和過(guò)氧化氫的酶。超氧化物是細(xì)胞中的主要活性氧之一。它是與神經(jīng)退行性疾病、缺血再灌注損傷、動(dòng)脈粥樣硬化和衰老相關(guān)的病理學(xué)的重要貢獻(xiàn)者。SOD是幾乎所有暴露于超氧自由基的細(xì)胞中重要的抗氧化防御。事實(shí)上，缺乏SOD1的小鼠會(huì)出現(xiàn)多種疾病，包括肝細(xì)胞癌，與年齡相關(guān)的肌肉質(zhì)量損失加速，白內(nèi)障的早期發(fā)病率和壽命縮短。SOD的過(guò)表達(dá)可保護(hù)小鼠纖維肉瘤細(xì)胞免于凋亡并促進(jìn)細(xì)胞分化。Amplite® 比色法超氧化物歧化酶 （SOD） 檢測(cè)試劑盒為測(cè)量溶液中的 SOD 活性提供了一種快速靈敏的方法。在測(cè)定中，黃嘌ling通過(guò)黃嘌ling氧化酶（XO）轉(zhuǎn)化為超氧自由基離子，尿酸和過(guò)氧化*。超氧化物與ReadiView™ SOD560反應(yīng)，生成吸收約560nm的產(chǎn)物。SOD抑制ReadiView™ SOD560與超氧化物的反應(yīng)，從而降低560nm處的吸收。ReadiView™ SOD560在560nm處吸收的減少與SOD活性成正比。該試劑盒可以方便地以 96 孔或 384 孔微量滴定板形式進(jìn)行。

組件

組件 A：ReadiView™ SOD560 2 瓶

組分B：50X黃嘌ling 1 瓶 （100 μL）

組分C：黃嘌ling氧化酶 2瓶

組分D：SOD標(biāo)準(zhǔn)品 1瓶（500單位）

組分E：檢測(cè)緩沖液 1 瓶 （20 mL）

示例協(xié)議

一目了然

協(xié)議摘要

1. 制備 SOD 標(biāo)準(zhǔn)品或測(cè)試樣品 （50 μL）

2. 加入 SOD 工作溶液 1 （25 μL）

3. 加入 SOD 工作溶液 2 （25 μL）

4. 在室溫下孵育 30 - 60 分鐘

5. 監(jiān)測(cè)560 nm處的吸光度

重要事項(xiàng) 在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)之前，在室溫下解凍所有試劑盒組分。

儲(chǔ)備溶液的制備

除非另有說(shuō)明，否則所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

SOD 標(biāo)準(zhǔn)溶液 （10 kU/mL）

將 50 μL 測(cè)定緩沖液（組分 E）加入 SOD 標(biāo)準(zhǔn)品（組分 D）小瓶中，制成 10 kU/mL 標(biāo)準(zhǔn)溶液。

標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

SOD標(biāo)準(zhǔn)

將 10 μL 10 kU/mL SOD 標(biāo)準(zhǔn)溶液加入 990 μL 檢測(cè)緩沖液（組分 E）中，得到 100 U/mL SOD 標(biāo)準(zhǔn)溶液 （SD7）。取 100 U/mL SOD 標(biāo)準(zhǔn)溶液 （SD7），在測(cè)定緩沖液（組分 E）中以 1：10 的比例進(jìn)行，得到 10 U/mL SOD 標(biāo)準(zhǔn)溶液 （SD6）。取 10 U/mL 標(biāo)準(zhǔn)溶液 （SD6） 并進(jìn)行 1：3 連續(xù)稀釋，以獲得帶有測(cè)定緩沖液（組分 E）的連續(xù)稀釋的 SOD 標(biāo)準(zhǔn)品 （SD5 - SD1）。

工作溶液的制備

1. SOD工作溶液1

將 2.5 mL 檢測(cè)緩沖液（組分 E）加入 ReadiView^TM SOD560（組分A）并充分混合。然后將 50 μL 的 50X 黃嘌ling（組分 B）加入該瓶中，制成 SOD 工作溶液 1。

注意本SOD工作溶液1應(yīng)在實(shí)驗(yàn)前制備，并避光保存。SOD工作溶液1不穩(wěn)定，未使用部分應(yīng)丟棄。

2. SOD工作溶液2

將 50 μL 測(cè)定緩沖液（組分 E）加入黃嘌ling氧化酶（組分 C）小瓶中并充分混合。然后，將 50 μL 黃嘌ling氧化酶儲(chǔ)備溶液轉(zhuǎn)移到 2.5 mL 測(cè)定緩沖液（組分 E）中，制成 SOD 工作溶液 2。

實(shí)驗(yàn)方案樣本

表 1. SOD標(biāo)準(zhǔn)品和測(cè)試樣品在透明底部96孔微孔板中的布局。SD=SOD標(biāo)準(zhǔn)品（SD1 - SD7，0.041至100 U/mL）;BL=空白控件;TS=測(cè)試樣品。

表 2. 每個(gè)孔的試劑組成。

1. 根據(jù)表1和表2中提供的布局制備SOD標(biāo)準(zhǔn)品（SD），空白對(duì)照（BL）和測(cè)試樣品（TS）。對(duì)于 384 孔板，每孔使用 25 μL 試劑而不是 50 μL。

2. 向SOD標(biāo)準(zhǔn)品、空白對(duì)照和測(cè)試樣品的每個(gè)孔中加入25 μL SOD工作溶液1，使總測(cè)定體積為75 μL/孔。對(duì)于 384 孔板，向每個(gè)孔中加入 12.5 μL SOD 工作溶液 1，總體積為 37.5 μL/孔。

3. 向SOD標(biāo)準(zhǔn)品、空白對(duì)照和測(cè)試樣品的每個(gè)孔中加入25μLSOD工作溶液2，使總測(cè)定體積為100μL/孔。對(duì)于 384 孔板，向每個(gè)孔中加入 12.5 μL SOD 工作溶液 2，總體積為 50 μL/孔。

4. 將反應(yīng)在室溫下孵育30至60分鐘，避光。

5. 用吸光度酶標(biāo)儀在550至560nm處監(jiān)測(cè)吸光度。

 AAT Bioquest比色超氧化物歧化酶測(cè)定試劑盒

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